糖脂代謝紊亂在糖尿病的發(fā)生、發(fā)展過程中具有 重要作用，因而尋找有效糾正糖脂代謝紊亂的藥 物，對防治 2 型糖尿病有積極作用 。過氧化物酶體 增殖體激活受體（PPARs）是核受體超家族配體依賴激 活核轉(zhuǎn)錄因子。目前已發(fā)現(xiàn)有 α、γ 和 δ 三種亞 型，PPARs 被證實在很多病理生理過程中發(fā)揮調(diào)控 作用，如糖、脂及膽固醇代謝，PPARs 是治療人類 代謝疾病的關(guān)鍵靶點 。目前臨床應(yīng)用的胰島素增敏 劑專屬和完全激動 PPARγ 受體，在發(fā)揮治療 2 型糖 尿病療效的同時，可產(chǎn)生增加體質(zhì)量、心衰等嚴(yán)重 不良反應(yīng)；而 PPARα、γ 雙和/或 PPARα、γ、δ 三 靶點部分激動劑可以克服這一局限，因而尋找 PPAR 雙和/或三靶點部分激動劑成為該領(lǐng)域研究的熱點。

8~10 周雌性 KK/Upj-AY 小鼠 50 只，體 質(zhì)量（32±3）g，SPF 級，以高脂飼料喂養(yǎng)，故體質(zhì)量 變化會比正常組小鼠明顯；8~10 周雌性 C57BL/6J 小 鼠 10 只，體質(zhì)量（26±2）g，SPF 級，北京華阜康生物科技股份有限公司，實驗動物許可證號：SYXK（軍） 2007-030。

和厚樸酚，自行制備，含量大于 95%，由中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院提供，經(jīng)王建農(nóng)研究 員通過高效液相色譜儀鑒定；鹽酸吡格列酮，美國 Santa Cruz Biotechnology 公司，批號：sc-204848A。 TC ELISA Kit，上海滬尚生物技術(shù)有限公司，批 號 ： SBJ- H0151； Rat/Mouse Insulin 96 Well Plate Assay，美國 Millipore 公司，貨號：#EZRMI-13K； 甲醛，南京寧誠化學(xué)藥品試劑有限公司，批號： 20100518；蘇木素-伊紅染液試劑盒，江蘇凱基生物 技術(shù)股份有限公司，批號： KGA244；中性樹，國藥 集團化學(xué)試劑有限公司，批號：10004160；二甲 苯，國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：1330-20- 7；甲醇，國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號：67-56-1；乙醇，國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號： 64-17-5；PBS 緩沖液，江蘇凱基生物技術(shù)股份有限 公司，批號：KGB5001，葡萄糖，國藥集團化學(xué)試劑 有限公司 批號：20130608。 普通飼料、高脂飼料（20% 蔗糖、2.5% 膽固 醇、10% 豬油、1% 膽酸鈉、66.5% 基礎(chǔ)飼料），北 京華阜康生物科技有限公司，批號：1110420618。

ACCU-CHEK Advantage 血糖檢測系統(tǒng)， 上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司；Elx800 型酶標(biāo)儀，美 國 BioTek 公司；ES-1100 型電子天平，湖南湘平儀器廠；THZ-312 型孵箱，上海精宏實驗設(shè)備有限公 司；BCD-258A/C 型冰箱，中國海爾公司；TS-8 型 轉(zhuǎn)移脫色搖床，海門市其林貝爾儀器制造有限公 司；101AS-3 型電熱扶風(fēng)干燥箱，上海圣欣科學(xué)儀 器有限公司；Olympus BX43 生物正置顯微鏡，日本 奧林巴斯公司；E200 型天平，德國賽多利斯公司； KGSP10 免疫組化筆，江蘇凱基生物技術(shù)股份有限公 司；RAK-2001 型耐高溫塑料染色架，福州邁新公司。

50 只 KK/Upj-AY 小鼠以專用高脂飼料飼養(yǎng) 4 周后，禁食12h，檢測空腹血糖（FBG），以 FBG≥13.9 mmol·L-1 為糖尿病小鼠標(biāo)準(zhǔn)，成模率 100%。KK/Upj-AY 小鼠造模成功 后隨機分為 5 組，即模型組、吡格列酮組（10 mg·kg-1 ）、 和厚樸酚低（25 mg·kg- 1 ）、中（50 mg·kg- 1 ）、高（100 mg·kg-1 ）劑量組，另取 10 只 C57BL/6J 小鼠作為正常 對照組，模型組和正常對照組給予同等體積的蒸餾 水，每天給藥1次，持續(xù) 35 d。

實驗期間，每日觀察大鼠毛色光澤 度，大、小便，精神狀態(tài)及活動度等；每周測定血 糖值和體質(zhì)量，給藥 35 d 后測定糖耐量、胰島素含 量及血脂各項指標(biāo)。

給藥期間每周測定血糖值 1 次， 上午給藥前禁食 3 h 后，采用尾靜脈取血，用 ACCU-CHEK Advantage 血糖檢測系統(tǒng)測量血糖值， 并記錄數(shù)值。

末次給藥后第 2 天，禁食 3 h， 開始糖耐量實驗的時間即為 0 h。測定 0 h 血糖值， 灌服劑量為 2.5 g·kg-1 的葡萄糖溶液，隨后測定 1 h、 2 h 血糖值，并計算曲線下面積 AUC。

給藥 35 d 后，禁食不禁水 12 h，眼眶取血，37 ℃水浴靜置 1 h， 3 500 r·min- 1 離心 10 min；取上層血清，采用 Rat/ Mouse Insulin 96 Well Plate Assay 試劑盒，按照其說 明書操作步驟進(jìn)行，測量出小鼠血清中胰島素及TC、HDL、LDL、TG 的含量。

KK/Upj-AY 小鼠以專用高脂飼料 飼養(yǎng) 4 周后，以 FBG≥13.9 mmol·L- 1 為模型復(fù)制成 功，即為 0 周，并開始給藥。給藥期間用 ES-1100 型電子天平每周測量體質(zhì)量 1 次，并記錄數(shù)值。

KK/Upj-AY 小鼠飼養(yǎng) 4 周后，按“1.4”給藥方法給 藥 35 d。實驗結(jié)束后，剖取胰腺組織，經(jīng) 10%福爾 馬林溶液固定，常規(guī)取材，脫水，石蠟包埋，制片 （4 μm 厚），HE 染色，光學(xué)顯微鏡觀察胰腺的病 變。主要觀察內(nèi)分泌部胰島的狀況：

（1）在 100 倍低 倍鏡下（目鏡 10 倍、物鏡 10 倍）測量每視野胰島 數(shù)；

（2）用“顯微鏡用側(cè)微尺”在 100 倍鏡下測量每 個胰島的面積。計算出每個標(biāo)本平均胰島數(shù)、每個 胰島的平均面積。

采用 SPSS 16.0 軟件對結(jié)果進(jìn) 行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差（x ± s）表示，兩組 間比較采用 t 檢驗，多組間比較采用單因素方差分析 及方差分析中均數(shù)的兩兩比較，變量的相互關(guān)系采 用多元相關(guān)分析。P＜0.05 或 P＜0.01 表示差異有統(tǒng) 計學(xué)意義。

小鼠血糖值 的影響。與正常組比較，模型組小鼠的血糖 值每周均顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，從第 1 周開始，和厚樸酚中劑量組、和厚樸酚高劑量組及 吡格列酮組小鼠的血糖值均顯著降低（P＜0.05，P＜ 0.01）。
 

小鼠糖耐量 的影響 見表 2。與正常組比較，模型組小鼠的 AUC 值明顯升高（P＜0.01）。與模型組比較，和厚樸酚中 劑量組、和厚樸酚高劑量組及吡格列酮組小鼠的 1、2 h 的 AUC 值均顯著降低（P＜0.05，P＜0.01）。

小鼠胰島素 表達(dá)水平的影響。與正常組比較，模型組小 鼠的胰島素表達(dá)水平顯著升高（P＜0.01）。與模型組 比較，和厚樸酚中劑量組、和厚樸酚高劑量組及吡 格列酮組小鼠的胰島素表達(dá)水平顯著降低（均 P＜ 0.01）。

小鼠血脂各 項指標(biāo)的影響。與正常組比較，模型組小鼠 血清中 TC、TG、LDL 及 HDL 含量均無統(tǒng)計學(xué)意 義。與模型組比較，和厚樸酚低劑量組小鼠血清中TC 及 TG 含量顯著降低（P＜0.01）；和厚樸酚中劑量 組小鼠血清中 TG、TC 及 LDL 含量均顯著降低（P＜ 0.05，P＜0.01）；和厚樸酚高劑量組小鼠血清中 TC 含量顯著降低，HDL 含量顯著升高（P＜0.01，P＜0.05）；吡格列酮組小鼠血清 TG 及 LDL 含量均顯著 降低（P＜0.01）。

小鼠體質(zhì)量 的影響。與正常組比較，模型組小鼠的體質(zhì) 量從第 0 周開始顯著升高（P＜0.01）。與模型組比 較，和厚樸酚中劑量組小鼠的體質(zhì)量從第 2 周開始 顯著降低（P＜0.01），和厚樸酚高劑量組小鼠的體質(zhì) 量從第 1 周開始顯著降低，（P＜0.05），吡格列酮組 小鼠的體質(zhì)量從第 2 周開始顯著降低（P＜0.05）。

小鼠胰腺組 織的影響。各組的胰腺外分泌部腺泡 的腺泡細(xì)胞及導(dǎo)管上皮無明顯病變。正常組內(nèi)分泌 部胰島的胰島分布于腺泡之間，團索狀，邊緣整 齊，HE 染色胰島細(xì)胞著色較淺。

高糖、高飽和脂肪攝入，以及缺乏運動的現(xiàn)代生 活方式，已經(jīng)促使糖尿病成為第三大非傳染性疾病。其中 2 型糖尿病占絕大多數(shù)，其胰島素分泌量 并不低，稱為非胰島素依賴性糖尿病，占糖尿病患 者總數(shù)的 90%以上。與 1 型糖尿病不同，2 型糖尿 病的關(guān)鍵病理環(huán)節(jié)并非胰島素缺乏，而是胰島素抵抗，改善胰島素抵抗是治療 2 型糖尿病的理想手 段。以噻唑烷二酮類為代表的 γ 過氧化物酶體增殖 體激活受體專屬和完全激動劑，可顯著增強靶組織 對胰島素的敏感性，作為胰島素增敏劑在臨床上用 于治療 2 型糖尿病，在非常小的劑量下，即具有顯 著減輕胰島素抵抗、改善糖代謝的臨床療效，為 2 型糖尿病治療提供了嶄新思路。但由于噻唑烷二酮 類為 PPARγ 專屬和完全激動劑，其活化和轉(zhuǎn)錄表達(dá) 不僅提高胰島素敏感性，而且同時促進(jìn)脂肪細(xì)胞分 化，調(diào)控參與炎性反應(yīng)、高血壓以及動脈硬化的相 關(guān)基因。因而作為 PPARγ 專屬和完全激動劑在取 得顯著臨床療效的同時，發(fā)現(xiàn)其有增加體質(zhì)量，導(dǎo) 致骨質(zhì)疏松、水鈉潴留和心衰等嚴(yán)重不良反應(yīng)。研 究表明，由于 PPARα/PPARγ 雙重部分激動劑或總 PPAR 部 分 激 動 劑（同 時 對 PPAR 的 三 個 亞 型 PPARα、PPARα/δ 和 PPARγ 有部分激動效應(yīng)）誘導(dǎo) 核受體采取不同構(gòu)象，導(dǎo)致核受體轉(zhuǎn)錄與 PPARγ 專 屬和完全激動劑不同的協(xié)同激動因子的擴充，可以實現(xiàn)與 PPARγ 完全激動劑產(chǎn)生 “最大化效應(yīng)”不同 的靶基因轉(zhuǎn)錄性調(diào)節(jié)效應(yīng)——次最大化效應(yīng)，從而 在對 2 型糖尿病保持良好治療作用的同時，避免相 應(yīng)的不良反應(yīng)。