桑葉:2018 年 11 月采摘于信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院,經(jīng)信陽(yáng) 農(nóng)林學(xué)院中藥教研室梁麗香副教授鑒定為桑(Morus alba L.)的成熟葉片;葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品:合肥博美生物科 技有限責(zé)任公司;蒽酮:上海展云化工有限公司;大孔 樹(shù)脂:山東魯抗立科藥物化學(xué)有限公司;濃硫酸、鹽酸、 氫氧化鈉、乙醇(分析純):武漢市中天化工有限責(zé)任公 司;瓊脂粉(分析純):北京亞米生物科技有限公司;大 腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌:信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院微 生物實(shí)驗(yàn)室;所有試驗(yàn)用水均為二次重蒸水。UV-1600 型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì):上海美普達(dá) 儀器有限公司;ME104 型電子分析天平:瑞士梅特勒 公司;HG101-3A 型電熱鼓風(fēng)干燥箱:南京卓鼎干燥設(shè) 備廠(chǎng);400Y 型多功能粉碎機(jī):永康市鉑歐五金制品有 限公司;RE-52AA 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器:上海亞榮生化儀器廠(chǎng);DKZ-2B 型電熱恒溫振蕩水槽:上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備 有限公司;RWBC-08S 型微波萃取反應(yīng)儀:南京蘇恩 瑞實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;JM-23D-40 型超聲波清洗器: 深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司;SPX-70BE 生化培養(yǎng) 箱、XFS-280A 型高壓滅菌鍋:上海力辰儀器科技有限 公司;層析柱[20 mm(15 mm)×200 mm]:江陰市新輝層 析設(shè)備有限公司。
上樣液 pH 值為 4.0 時(shí) AB-8 型樹(shù)脂 對(duì)桑葉多糖的吸附率最高,為 90.06%,當(dāng)上樣液 pH 值 低于 3.0 或高于 5.0 時(shí),多糖在相對(duì)偏酸或偏堿的溶液 中溶解度較差,不利于樹(shù)脂的吸附,因此最佳上樣液 pH 值為 4.0。在解吸液 pH 值為 6.0 時(shí) AB-8 型樹(shù)脂對(duì) 桑葉多糖的解吸率最高,為 78.11%;在 pH 值小于 6.0 時(shí),解吸率隨酸性增加而降低;而在 pH 值大于 6.0 的 中性和弱堿性環(huán)境中,解吸率呈降低趨勢(shì),所以最佳 解吸液 pH 值為 6.0。這可能因?yàn)樯H~中多糖類(lèi)物質(zhì)多 數(shù)顯弱酸性,在 pH 3.0~5.0 的溶液中呈穩(wěn)定的分子 狀態(tài)被吸附,而在 pH 值為 6.0 的環(huán)境多呈游離態(tài),不 利于吸附而被洗脫下來(lái)。上樣液濃度過(guò)高,雜質(zhì)也會(huì) 與多糖分子同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)吸附,甚至?xí)a(chǎn)生沉淀堵塞樹(shù)脂 孔道,阻礙大孔樹(shù)脂對(duì)多糖分子的吸附。所以,桑葉 多糖適宜的上樣液濃度為 3.0 mg/mL。